ישי גולן הוא שחקן. הוא החל את הקריירה הקולנועית שלו בגיל 17 ב"דרך הנשר", סרטו של אורי ברבש מ-1990. בהמשך הופיע גולן גם בתיאטרון ובטלוויזיה. בין סרטי הקולנוע שבהם השתתף: "מנת יתר" (שמואל אימברמן, 1993), "שישה מיליון רסיסים" (ציפי טרופה, 2001), "חיי אהבה" (מריה שרדר, 1997), "הנותנת" (הגר בן־אשר, 2011), "אנטנה" (אריק רוטשטיין, 2016), "הדרך לאן" (מיכל בת־אדם, 2016) ו"הגולם" (יואב ודורון פז, 2018).
את פריצתו הגדולה לתודעת הקהל עשה גולן בסדרה "טירונות" של האחים ברבש. בהמשך השתתף גם בסדרות הטלוויזיה "האי", "תא גורדין", "כפולים" ו"אקדמיית החממה". תפקידו בסדרה "חטופים" זיכה אותו בפרס האקדמיה לטלוויזיה לשחקן הטוב ביותר. בשנים 2013–2016 הגיש גולן את התוכנית "אוכל מסביב לעולם", ששודרה במדינות רבות וזכתה בפרסים.